రీకాంబినెంట్ స్పైక్ ప్రోటీన్ ఆధారంగా పోర్సిన్ అక్యూట్ డయేరియా సిండ్రోమ్ కరోనావైరస్ IgG యాంటీబాడీని గుర్తించడం కోసం పరోక్ష ELISA పద్ధతి అభివృద్ధి

పోర్సిన్ అక్యూట్ డయేరియా సిండ్రోమ్ కరోనా వైరస్ (SADS-CoV) అనేది కొత్తగా కనుగొనబడిన పోర్సిన్ ఎంటర్‌టిక్ పాథోజెనిక్ కరోనావైరస్, ఇది నవజాత పందిపిల్లలలో నీటి విరేచనాలకు కారణమవుతుంది మరియు పందుల పరిశ్రమకు గణనీయమైన ఆర్థిక నష్టాన్ని కలిగిస్తుంది.ప్రస్తుతం, SADS-CoV ఇన్ఫెక్షన్ మరియు వ్యాక్సిన్ యొక్క ప్రభావాన్ని అంచనా వేయడానికి తగిన సెరోలాజికల్ పద్ధతి లేదు, కాబట్టి ఈ లోపాన్ని భర్తీ చేయడానికి సమర్థవంతమైన ఎంజైమ్-లింక్డ్ ఇమ్యునోసోర్బెంట్ అస్సే (ELISA)ని ఉపయోగించడం అత్యవసరం.ఇక్కడ, మానవ IgG Fc డొమైన్‌తో సంలీనమైన SADS-CoV స్పైక్ (S) ప్రొటీన్‌ను వ్యక్తీకరించే రీకాంబినెంట్ ప్లాస్మిడ్ రీకాంబినెంట్ బాకులోవైరస్‌ను ఉత్పత్తి చేయడానికి నిర్మించబడింది మరియు HEK 293F కణాలలో వ్యక్తీకరించబడింది.S-Fc ప్రోటీన్ ప్రోటీన్ G రెసిన్‌తో శుద్ధి చేయబడుతుంది మరియు మానవ-వ్యతిరేక Fc మరియు యాంటీ-SADS-CoV యాంటీబాడీస్‌తో రియాక్టివిటీని కలిగి ఉంటుంది.అప్పుడు S-Fc ప్రోటీన్ పరోక్ష ELISA (S-iELISA) ను అభివృద్ధి చేయడానికి మరియు S-iELISA యొక్క ప్రతిచర్య పరిస్థితులను ఆప్టిమైజ్ చేయడానికి ఉపయోగించబడింది.ఫలితంగా, ఇమ్యునోఫ్లోరోసెన్స్ అస్సే (IFA) మరియు వెస్ట్రన్ బ్లాటింగ్ ద్వారా నిర్ధారించబడిన 40 SADS-CoV నెగటివ్ సెరా యొక్క OD450nm విలువను విశ్లేషించడం ద్వారా, కట్-ఆఫ్ విలువ 0.3711గా నిర్ణయించబడింది.S-iELISA పరుగుల లోపల మరియు వాటి మధ్య 6 SADS-CoV పాజిటివ్ సెరా యొక్క కోఎఫీషియంట్ ఆఫ్ వేరియేషన్ (CV) అన్నీ 10% కంటే తక్కువగా ఉన్నాయి.క్రాస్-రియాక్టివిటీ పరీక్షలో S-iELISAకి ఇతర పోర్సిన్ వైరస్ సెరాతో క్రాస్-రియాక్టివిటీ లేదని తేలింది.అదనంగా, 111 క్లినికల్ సీరం నమూనాల గుర్తింపు ఆధారంగా, IFA మరియు S-iELISA యొక్క మొత్తం యాదృచ్చిక రేటు 97.3%.సీరం యొక్క 7 వేర్వేరు OD450nm విలువలతో వైరస్ న్యూట్రలైజేషన్ పరీక్ష S-iELISA ద్వారా కనుగొనబడిన OD450nm విలువ వైరస్ న్యూట్రలైజేషన్ పరీక్షతో సానుకూలంగా సంబంధం కలిగి ఉందని తేలింది.చివరగా, S-iELISA 300 పిగ్ ఫామ్ సీరం నమూనాలపై ప్రదర్శించబడింది.ఇతర పోర్సిన్ ఎంట్రోవైరస్‌ల యొక్క వాణిజ్య కిట్‌లు SADS-CoV, TGEV, PDCoV మరియు PEDV యొక్క IgG సానుకూల రేట్లు వరుసగా 81.7%, 54% మరియు 65.3%గా ఉన్నాయని చూపించాయి., 6%, వరుసగా.S-iELISA నిర్దిష్టమైనది, సున్నితమైనది మరియు పునరుత్పత్తి చేయగలదని ఫలితాలు చూపిస్తున్నాయి మరియు పందుల పరిశ్రమలో SADS-CoV సంక్రమణను గుర్తించడానికి ఉపయోగించవచ్చు.ఈ వ్యాసం కాపీరైట్ ద్వారా రక్షించబడింది.అన్ని హక్కులు ప్రత్యేకించబడ్డాయి.